El sistema ThinPrep® T 2000 y T 5000 son una alternativa al método convencional de preparación de extensiones de Hematoxilina – Eosina y/o Papanicolaou utilizadas para la detección de microorganismos patógenos, células atípicas, cáncer o sus lesiones precursoras (lesiones intraepiteliales de bajo grado, lesiones intraepiteliales de alto grado como en el caso de la orina), así como otras categorías citológicas según se define en los diferentes sistemas de clasificación internacional.
Fig. 1: THINPREP 2000: Tecnología que procesa muestra a muestra en donde se demora aproximadamente 40 segundos en obtener un botón celular.
Fig. 2: THINPREP 5000: Tecnología que procesa hasta 20 muestras el equipo tarda aproximadamente 40 minutos en obtener 20 botones celulares.
El proceso con ThinPrep® comienza con la recogida de la muestra no ginecológica (Punción Tiroidea guiada por ecografía) por parte del médico especialista (Radiólogo) utilizando un dispositivo especial de muestreo indicado por el servicio de Radiología. En lugar de colocarse sobre un portaobjetos, si la muestra es escasa (menos de 3 ml) la jeringa y su aguja se sumergen y se lavan en un vial con 20 ml de Cytolyt con el fin de llevar todo el material recolectado al medio preservante y medio que sirve adicionalmente para eliminar elementos contaminantes como sangre, moco e inflamación. El vial con la muestra de ThinPrep se tapona, se etiqueta y se envía al laboratorio equipado con un procesador ThinPrep 2000 o T5000 según sea el caso.
Si la muestra excede los 3 ml deberá centrifugarse directamente en el laboratorio de Patología. La muestra centrifugada se decantará y se verterá únicamente el sedimento directamente al vial con solución preservante PreservCyt.
Fig. 3: Solución preservante PreservCyt.
En el laboratorio, el vial con la muestra con PreservCyt se deja fijar por 20 minutos y luego se coloca al interior del procesador ThinPrep 2000 o T5000, en un proceso de dispersión se desintegra la sangre, el moco y los detritos no utilizados en el diagnóstico, sin desaparecer elementos importantes para el diagnóstico como el material coloide, fibrina, colágeno o diátesis tumoral para mezclar finalmente las células de forma homogénea. Éstas se recogen en un filtro ThinPrep para pruebas de Citología No Ginecológicas preparado especialmente para la recogida de células para diagnóstico. El procesador ThinPrep 2000 y T5000 supervisan constantemente el flujo a través del filtro ThinPrep para pruebas de Hematoxilina – Eosina y Papanicolaou durante el proceso y evitar así una recogida de células demasiado escasa o densa. A continuación, se coloca una fina capa de células sobre un portaobjetos de vidrio con carga electroquímica que a su vez evita que desprendan las células durante su procesamiento, depositándolas dentro de un círculo de 20 mm de diámetro, y el portaobjetos queda automáticamente depositado en una solución fijadora.
Dispersión
Recogida de células
Transferencia de células
Fig. 4: Proceso al interior del equipo T2000 O T5000
Al igual que con las extensiones de Hematoxilina – Eosina y Papanicolaou convencionales, se realizará el número de láminas que así decida el laboratorio (una para rutina y más de una si requieren estudios específicos de histoquímica e inmunohistoquímica) los portaobjetos preparados con el sistema ThinPrep® 2000 y T 5000 se examinan dentro del contexto de la historia clínica del paciente y de la información obtenida con otros procedimientos de diagnóstico, tales como biopsias, radiografías, tomografía axial computarizada y pruebas de laboratorio clínico complementarias para determinar el tratamiento del paciente.
1. Objetivo
Realizar la correlación de interpretación y resultados de varios observadores del método para citología en base líquida ThinPrep® en el equipo Processor T2000 y/o T5000 empleando muestras tomadas en el servicio de radiología e imágenes diagnósticas del Servicio de Radiología, las muestras obtenidas son remitidas al Laboratorio de Patología, con el fin de garantizar un adecuado desempeño del producto.
2. Tipo de muestra
Se emplearon 5 muestras obtenidas por Biopsia Aspiración Con Aguja Fina (BACAF) de tiroides y 1 muestra obtenida por Biopsia Aspiración Con Aguja Fina (BACAF) de ganglio linfático, considerando las condiciones descritas tales como: obtención, recolección, fijación, almacenamiento, temperatura, tiempo, transporte y embalaje de cada uno de los especímenes.
3. Muestreo
En sistema ThinPrep® 2000 y T5000 se procesan dos láminas por cada una de las muestras obtenidas en salas de radiología para realizar el ejercicio de eficacia de la tecnología. Se obtienen dos láminas por el método en base líquida más un bloque celular, una de ellas se colorea con Hematoxilina – Eosina y la otra con Papanicolaou, el bloque celular se colorea con Hematoxilina – Eosina. Adicionalmente, se obtienen dos lecturas por el mismo método (1 Médico Patólogo y una Citohistotecnóloga). Se registran y recopilan los datos de interpretación y lectura por observador, se analizan los datos obtenidos del ejercicio.
Se recolectan 6 muestras: se realizan BACAF (Biopsia Aspiración Con Aguja Fina) de Glándula Tiroides (Lóbulo Tiroideo Izquierdo o Derecho(5) y Ganglio Linfático(1)) Guiados por Ecografía del cual se obtienen entre 0.2 ml y 0,3 ml de material de aspecto hemorrágico. Se lleva todo el material inmediatamente al vial con solución de Cytolyt.
4. Emisión de concepto Inter observadores
La lectura de las 6 muestras incluidas en la verificación fue realizada por dos profesionales de la salud que se designaron como:
Observador 1: MD Patólogo; Observador 2: Citólogo.
Resultados Citología Base Liquida ThinPrep®
Tabla 1. Resultados método en Verificación -Citología Base Liquida ThinPrep®
Las muestras No. 1 a 6 presentan una interpretación satisfactoria por los observadores con el método en verificación en base líquida ThinPrep® Pap Test.
5. Conclusiones
- Por medio de esta verificación se infiere que el método ThinPrep® Pap Test cumple con las especificaciones de desempeño establecidas para la evaluación morfológica en muestras citológicas no ginecológicas (Punciones de Tiroides), bajo las condiciones analíticas de los diferentes Laboratorios de Patología.
- Se infiere que los viales ThinPrep® Pap Test presentan una mejor conservación de material para análisis posteriores como en el caso de la histoquímica e inmunocitoquímica, con una mejor estabilidad de la muestra mediante sus soluciones preservantes.
- Los Médicos Patólogos y lectores fueron entrenados en el exterior (Estados Unidos) en lectura de (Biopsias Aspiraciones Con Aguja Fina de Glándula Tiroides Guiado por Ecografía), evaluaron el número de células obtenidas en un botón de 20 mm, la distribución celular, el detalle celular mejorado, el tamaño de las células foliculares, oncocíticas, Histiocitos, Células Gigantes Multinucleadas histiocitarias, Hematíes y Polimorfonucleares, la calidad de la cromatina y demás detalles morfológicos es idéntico a las muestras que ellos evaluaron durante su estadía en Estados Unidos.
- La coloración de la muestra mejora considerablemente lo que permite una mejor visualización al microscopio, también aseguran que la cantidad de células es adecuada para su evaluación, que el fondo aparece notoriamente más limpio de hemorragia e inflamación haciendo más fácil la interpretación citomorfológica, reduciendo el tiempo de lectura.
- El método ThinPrep® Pap Test en tecnología T2000 Y T5000 presentan mayor confiabilidad a la hora del procesamiento de la muestra e interpretación diagnóstica eliminando por completo las muestras repetitivas por mala preservación celular.
- El método ThinPrep® Pap Test permite evaluar de forma individual las células de una mejor manera, ya que evita que las células presenten solapamiento o fenómenos de tridimensionalidad sin que verdaderamente lo sean, como en los casos de neoplasia donde dichas formaciones se presentan de forma usual, pero que cuando ellos existen la técnica no las separa (conservación morfológica).
- Con la técnica de ThinPrep® Pap Test adicionalmente, siempre quedará muestra para realizar bloques celulares lo que permite obtener una muestra que se conservará por mucho más tiempo si se requieren estudios complementarios.
- Desde ya hace varios años se ha evidenciado que por diferentes técnicas en base líquida no se podía interpretar la muestra de forma adecuada, debido a esto se utilizó siempre el extendido convencional que consiste en llevar el material aspirado directamente a la lámina, por consiguiente, se presentaban muchas láminas, sobreposición y solapamiento de las células lo que no facilita su interpretación diagnóstica.
- El método ThinPrep® Pap Test presentan mayor confiabilidad a la hora del procesamiento de la muestra e interpretación diagnóstica eliminando por completo las muestras repetitivas por mala preservación celular.
- El 100% del material celular es evaluado, ya que se evita la sobreposición celular, se reduce significativamente el número de láminas y el tiempo que se emplea en más de 4 láminas que usualmente se reciben en citología convencional.
Bibliografía
- The 2017 Bethesda System for Reporting Thyroid Cytopathology Edmund S. Cibas1 and Syed Z. Ali2.
- Nueva clasificación de la OMS de los tumores tiroideos: una categorización pragmática de las neoplasias de la glándula tiroides. José Manuel Cameselle-Teijeiro, Manuel Sobrinho-Simões.
- Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples; Approved CLSI. User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance; Approved Guideline-Second Edition. CLSI document EP12-A2 – Ítem 9 Comparison of Methods.
- https:www.hologic.com
